PCR-analyysi: mitä se on? Miten PCR-testi otetaan oikein

Ei niin kauan sitten, luotettava,erittäin herkkä ja nopea tapa diagnosoida eri tartuntatautien henkilö. Tätä menetelmää kutsutaan "PCR-analyysiksi". Mitä se, mitä sen ydin, mitä mikro-organismeja se voi paljastaa ja miten se hoidetaan oikein, kerromme artikkelissamme.

Historian löytö

Hankkiutui polymeraasiketjureaktiomenetelmä (PCR)Amerikkalainen tiedemies Cary Myullis vuonna 1983. Aluksi patentoitu diagnoosi menetelmä "Cetus Corporation", jossa hänen luoja työskenteli. Mutta vuonna 1992 kaikki oikeudet ja patentit myytiin yritykselle "Hoffman-La Roche". Sen jälkeen näytti siltä, ​​että samankaltaiset samankaltaiset tutkimukset tehtiin ja kirjattiin muissa amerikkalaisissa biologeissa, kuten Alice Chen, David Edgar, John Treel. Vuonna 1980 Neuvostoliiton tutkijat A. Slyusarenko, A. Kaledin ja S. Gorodetsky käsittelivät tätä ongelmaa. Sen vuoksi ei ollut mahdollista määritellä ainoaa oikeutta. Monet erinomaiset biokemistit ovat myötävaikuttaneet polymeraasiketjureaktion menetelmän kehittämiseen ja patentoitava niiden innovaatiot. Tällä hetkellä PCR-analyysi suoritetaan kaikkialla erityisissä laboratorioissa.

PCR-diagnoosimenetelmän ydin

PCR-analyysi: mikä se on ja miten se toimii? Menetelmän ydin on lisätä tietyssä mikrobiväliaineessa DNA-polymeraasin erityisellä entsyymillä keinotekoisissa olosuhteissa. Tätä varten moninkertaista olemassa oleva DNA-materiaali. Näin ollen näytteessä patogeenisen mikro-organismin läsnä ollessa sen määrää lisätään biokemiallisilla laboratoriomuutoksilla, ja bakteeri voidaan helposti havaita mikroskoopilla.

PCR-analyysi - mitä se on?

Miten aineellista tutkimusta tehdään?

Analyysi edellyttää:

  • DNA-templaattina;
  • alukkeet, jotka yhdistävät materiaalin kappaleen päitä;
  • termisesti stabiili DNA-polymeraasientsyymi;
  • kemialliset aineet, joilla varmistetaan entsyymien asianmukainen toiminta;
  • puskuriliuos, joka on välttämätöntä luoda asianmukaiset olosuhteet DNA-materiaalin kasvulle ja kehittämiselle.

    PCR-analyysi 12

PCR: n suorittamiseksi suoritetaan 25-30 toistoa, jotka koostuvat kolmesta vaiheesta: denaturointi, hehkutus ja venymä.

Polymeraasiketjureaktion analysointiinkäytä erityistä laitetta - vahvistinta. Modernin laitteiston avulla voit asettaa tarvittavat ohjelmat putkien lämmittämiseksi ja jäähdyttämiseksi virheiden poistamiseksi diagnoosin aikana.

Missä käytetään diagnoosia?

Polymeeriketjureaktiomenetelmää käytetään eri lääketieteen aloilla:

  • Oikeuslääketieteen tutkijat käyttävät sitä tunnistamaan geneettistä materiaalia, kuten hiuksia, sylkeä tai verta;
  • PCR-vertaanalyysi auttaa genotyyppien avulla esimerkiksi havaitsemaan yksittäisen geneettisesti muokatun reaktion tiettyyn lääkeaineeseen;
  • tällaisen menetelmän avulla voidaan luoda perhesiteet ihmisten välillä;
  • suosituin PCR-menetelmä on tullut lääketieteelliseen diagnostiikkaan erilaisten tartuntatautien määrittelemiseksi.

Mitkä infektiot paljastavat PCR: n?

Niinpä lääke on pitkään ja onnistuneesti käyttänyt PCR: n analyysiä. Mikä se on, olemme jo oppineet. Ja mitä taudinaiheuttajia voidaan havaita sen kanssa? Seuraavat tartuntataudit diagnosoidaan PCR: llä:

  • hepatiitti A, B, C;
  • ureaplasmosis;
  • kandidiaasi;
  • klamydia;
  • mykoplasmoosin;
  • bakteerivaginoosi;
  • tarttuva mononukleoosi;
  • trichomoniasis;
  • papillomavirusinfektio;
  • tuberkuloosi;
  • 1. ja 2. tyypin herpesinfektio;
  • Helicobacter pylori-infektio;
  • sytomegalovirus;
  • kurkkumätä;
  • salmonelloosiin;
  • HIV-infektio.

    PCR-analyysi HIV: lle

Myös syöpädiagnoosissa käytetään PCR-menetelmiä.

Menetelmän edut

Diagnoosi PCR: llä on useita etuja:

  1. Korkea herkkyys. Vaikka vain muutamat mikro-organismin DNA-molekyylit, PCR-analyysi määrittää infektion läsnäolon. Menetelmä auttaa kroonisissa ja piilevissä sairauksissa. Usein tällaisissa tapauksissa mikro-organismi on viljelty muilla tavoin.
  2. Tutkimuksen kannalta sopivaa materiaalia, kuten sylki, veri, sukupuoli, hiukset, epiteelisolut, sopii. Yleisin on verikoke ja urogenitaalinen smear PCR: ssä.

    PCR: testi

  3. Se ei vaadi pitkää viljelyä. Automaattisen diagnostiikkaprosessin avulla voit saada tutkimuksen tulokset 4-5 tunnin kuluttua.
  4. Menetelmä on melkein 100% luotettava. Vain yksittäisiä vääriä negatiivisia tuloksia raportoitiin.
  5. Kyky tunnistaa useita tyyppejäpatogeeneistä yhdestä ainestenäytteestä. Tämä paitsi nopeuttaa taudin diagnosointiprosessia myös vähentää merkittävästi materiaalikustannuksia. Usein lääkäri määrää kattavan PCR-analyysin. Tutkimuksen hinta, joka koostuu kuudesta taudinaiheuttajasta, on noin 1500 ruplaa.

Suositukset analyysin valmistelusta

Jotta tulokset olisivat luotettavia PCR-tutkimuksessa, analyysi olisi tehtävä suositusten perusteella diagnoosin valmistelua varten:

  1. Ennen kuin päästät syljen, sinun ei pidä ottaa ruokaa ja lääkitystä 4 tuntia ennen materiaalin ottamista. Huuhtele suu välittömästi ennen toimenpidettä kiehuvaan veteen.
  2. Edellä mainittuja sääntöjä on noudatettava otettaessa näytettä posken sisäpinnalta. Huuhtelun jälkeen on suositeltavaa suorittaa kevyt ihohieronta eristettäessä rauhasten erittymistä.
  3. Virtsasta kerätään yleensä kotona. Tätä varten sinun on suoritettava perusteellinen sukupuolielinten WC. On tarpeen kerätä 50-60 ml virtsaa steriilissä muovisäiliössä. Materiaalin puhtauden varmistamiseksi on suositeltavaa, että naiset asettavat tamponin emättimeen ja miehet vetävät ihon taitoksen mahdollisimman korkealle. Et voi ottaa materiaalia kuukautisten aikana.
  4. Spermiin sinun on pidättäydyttävä seksistäToimi 3 päivää ennen keräilyä. Myös lääkärit neuvovat kieltäytymään käymästä saunassa ja kuumassa kylvyssä, juomassa alkoholia ja mausteista ruokaa. 3 tuntia ennen testiä, sinun on pidättäydyttävä virtsaamasta.
  5. Urogenitaalisen smearin toimittamiseen, esimerkiksi josklamydia-PCR: n analyysiä, sekä naisille että miehille suositellaan seksuaalista lepoa 3 vuorokautta. 2 viikkoa ennen testiä, antibakteerisia lääkkeitä ei tule ottaa. Viikon ajan sinun on lopetettava intimisten geelien, voiteiden, emättimen suppositorioiden, syringingin käytön. 3 tuntia ennen testiä, sinun on pidättäydyttävä virtsaamasta. Kuukautisten aikana aineen keräämistä ei suoriteta, vasta 3 päivän kuluttua verenvuodon lopettamisesta voi olla urogenitaalinen tahra.

PCR raskauden aikana

Vauvojen odotusaikana monet tarttuvatSeksuaalisesti tarttuvat taudit ovat erittäin vaarallisia sikiön normaalille kehitykselle. STD: t voivat aiheuttaa kohdunsisäisen kasvun hidastumisen, keskenmenon tai ennenaikaisen syntymän, lapsen synnynnäiset epämuodostumat. Siksi on äärimmäisen tärkeää siirtää aikaisin PCR-testi. Analyysi on toimitettava rekisteröinnissä - enintään 12 viikkoa.

Analyysi Chlamydia PCR: stä

Aidemateriaali on peräisin kohdunkaulan kanavastaerityisellä harjalla. Menettely on kivuton ja ei aiheuta vaaraa vauvalle. Yleensä raskauden aikana klamydia analysoidaan PCR-menetelmällä, samoin kuin ureaplasmoosi, mykoplasmoosi, sytomegalovirus, herpes ja papillomavirus. Tällaista koemenetelmää kutsutaan PCR-6: ksi.

PCR HIV-diagnoosiin

Mitä tulee siihen, että polymeraasiketjureaktion menetelmäreaktio on hyvin herkkä kehon muutoksille ja diagnoosiolosuhteille, monet tekijät voivat vaikuttaa tulokseen. Siksi HIV-infektion PCR-analyysi ei ole luotettava menetelmä, sen tehokkuus on 96-98%. Jäljellä olevissa 2-4 prosentissa tapauksista testit antavat vääriä positiivisia tuloksia.

Mutta joissakin tilanteissa ilman HIV: n PCR-diagnoosiaei hallita. Yleensä se annetaan ihmisille, joilla on väärä negatiivinen ELISA-tulos. Tällaiset indikaattorit osoittavat, että henkilö ei ole vielä kehittänyt vasta-aineita virukselle eikä niitä voida havaita ilman lukujen moninkertaistumista. Tämä voidaan saavuttaa suorittamalla verikokeita käyttäen PCR-menetelmää.

Myös tämä diagnoosi on välttämätöntä HIV-positiivisen äidin syntymän ensimmäisen vuoden elämän lapsille. Menetelmä on ainoa tapa määrittää luotettavasti lapsen tila.

PCR hepatiitin diagnosointiin

Polymeraasiketjureaktion menetelmä salliihavaita hepatiitti A-, B-, C-viruksen DNA ennen infektion vasta-aineiden muodostumista tai taudin oireiden ilmaantumista. Erityisen tehokas on hepatiitti C: n PCR-analyysi, koska 85 prosentissa tapauksista tällainen sairaus etenee oireettomasti ja ilman ajoissa tapahtuvaa hoitoa siirtyy krooniseen vaiheeseen.

PCR-verikoe

Taudinaiheuttajan ajoissa havaitseminen auttaa välttämään komplikaatioita ja pitkittynyttä hoitoa.

Kattava PCR-tutkimus

Monimutkainen PCR-analyysi: mikä se on?Tämän testin menetelmä polimezarnoy ketjureaktio, joka sisältää määrittämiseksi samanaikaisesti useiden lajien infektio: Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, Gardnerella vaginalis, Candida, trichomonas, sytomegalovirus, Ureaplasma urealitikum, herpes 1. ja 2. tyypin, tippuri papilloomavirusta. Hinta tämä diagnoosi vaihtelee 2000 ja 3500 ruplaa. riippuen klinikan, materiaaleja ja laitteita, sekä tyypin analyysi: laadullinen tai määrällinen. Mitä tarvitaan sinun tapauksessa - lääkäri päättää. Joissakin tapauksissa vain yksinkertaisesti havaita taudinaiheuttajan toisissa, kuten HIV, tärkeä rooli kvantitatiivisen tiitteri. jäljempänä "PCR-analyysi 12" diagnoosissa kaikki edellä patogeenien tutkimus.

Selitys analyysituloksista

PCR-analyysin dekoodaus ei ole vaikeaa.Indikaattoria on vain 2 asteikkoa - "positiivinen tulos" ja "negatiivinen tulos". Jos taudinaiheuttaja havaitaan, lääkärit voivat vahvistaa taudin läsnäolon 99 prosentin luottamuksella ja jatkaa potilaan hoitoa. Kvantitatiivinen menetelmä infektion määrittämiseksi vastaavassa sarakkeessa ilmaistaan ​​havaittujen bakteerien numeerinen arvo. Vain lääkäri voi määrittää taudin asteen ja määrätä tarvittavan hoidon.

Missä siirtää PCR-analyysi?

Joissakin tapauksissa esimerkiksi määritettäessäHIV-infektio PCR-menetelmällä, negatiivisella tuloksella, on tarpeen suorittaa lisätutkimuksia tulosten vahvistamiseksi.

Mistä analysoida?

Missä PCR-analyysi esitetään:valtion poliklinikassa tai yksityisessä laboratoriossa? Valitettavasti kunnallisissa laitoksissa laitteet ja menetelmät ovat usein vanhentuneita. Siksi on parempi antaa etusija yksityisille laboratorioille, joissa on nykyaikaiset laitteet ja erittäin pätevä henkilökunta. Lisäksi yksityisessä klinikassa saat tuloksia paljon nopeammin.

Moskovassa monet yksityiset laboratoriot tarjoavatPCR-analyysiä eri infektioissa. Esimerkiksi klinikoissa, kuten Vita, Complex Clinic, Happy Family ja Uro-Pro, suoritetaan PCR-analyysi. Tutkimuksen hinta on 200 ruplaa. yhden patogeenin määrittelemiseksi.

Voidaan päätellä, että tartuntatautien diagnoosiPCR on useimmissa tapauksissa nopea ja luotettava tapa havaita patogeeni elimistössä infektioiden varhaisvaiheissa. Mutta tietyissä tapauksissa kannattaa valita muita diagnoosimenetelmiä. Tällaisen tutkimuksen tekemisen tarvetta voi määrätä vain asiantuntija. PCR-analyysin dekoodaaminen edellyttää myös ammattimaista lähestymistapaa. Noudata lääkärin suosituksia ja äläkä anna itsellesi testejä, jotka eivät ole välttämättömiä.

piti:
0
Neichiporenkon urinaalinen analyysi. Miten koota se
Virtsan yleinen analyysi. Miten ottaa ja mikä on normi?
Miten ulosteinen okkulttinen veri testataan?
Mistä ryöstää analyysiä? Mitä tehdä milloin
Kuinka oikein luovuttaa ulosteen analyysi ja onko se tarpeellista
Kuinka lahjoittaa verta hormoneihin oikein?
HI-virusta voidaan käyttää verikokeessa
Miten virtsatesti voidaan toimittaa oikein?
Mitä virtsan analyysi kertoo (dekoodaus)
Parhaat viestit
ylös